Gradiente PCR Series aterrizó introducir el principio de territorio PCR (Touchdown PCR) conocimiento PCR Touchdown PCR reacción recocido temperatura 1 ° C cada ciclo para reducir la temperatura de templado hasta que alcance el "Touchdown", entonces esta temperatura de recocido alrededor del 10 ciclo. El método aparecen inicialmente compleja reacción se lleva a cabo con el fin de evitar para determinar la temperatura óptima y el proceso de optimización. Cualquier diferencia entre la temperatura correcta y no correcto de recocido se traducirá en cada ciclo doble de la diferencia de la cantidad de producto de PCR (resultante en 4-veces la diferencia) por grado Celsius. Por lo tanto, el producto correcto puede obtenerse con respecto a los productos no correctas enriquecidas en otra aplicación del método para determinar la secuencia de ADN de un péptido de secuencia conocida. El proceso específico es el siguiente: el uso de dos conjuntos de péptido de secuencia conocida en ambos extremos puede ser emparejado Jane cebadores, sólo necesita saber que el período de duración de la 13 secuencia de aminoácidos del péptido ácido, el cebador 5 'y 3' de cada longitud de 18 bases (6 aminoácidos) entre los dos intervalos de una o más bases. Utilizando cebadores degenerados que pueden ser "Touchdown PCR. Obtenido por este método será un gran número de producto, sino porque por la secuencia del péptido se puede saber la distancia exacta entre los cebadores, es posible de acuerdo con el tama?o del producto para seleccionar el producto deseado. La ventaja de este método es que el producto correctamente emparejadas del cebador y la plantilla puede ser enriquecida. Si la clonación y la medición de los productos de PCR será una docena puede determinar correctamente la secuencia del péptido de codificación, el dise?o de oligonucleótidos que hibridan. La técnica es particularmente adecuada para el polipéptido constituido por Ser, Lys, y Arg (cada uno con seis codones). Touchdown PCR: ventajas Integral relativamente común gradiente PCRhttp :/ / www.jntckj.cn/ tecnología y la dosis máxima tolerada de reacción en cadena de polimerasa, que el primer procedimiento es simple, ahorro de tiempo, la amplificación por PCR puede ser completado, pero la desventaja es la temperatura de recocido no es propenso a falsos positivos, aunque la dosis máxima tolerada de los procedimientos de reacción de polimerasa en cadena son complicadas, necesita instrumento con una memoria más grande, pero puede ser muy eficaz para reducir o evitar los falsos positivos, y no en las condiciones de trabajo ideales (tal como la concentración óptima de iones de magnesio) también se pueden amplificar producto. Esta tierra es la ventaja de la tecnología PCR. Pero me parece. Puede ser ampliado por la técnica de PCR convencional fuera, intente utilizar la reacción en cadena de la polimerasa normal, a pesar de la reacción en cadena de la polimerasa aterrizaje ahorrar tiempo y esfuerzo, pero se encuentra en una amplificación muy amplio de temperaturas de recocido, bandas lío ciertamente Doha . Aunque la electroforesis no puede ver. El touchdown PCR una ventaja que puede aumentar la especificidad de ciertos genes, no sólo la mía en la expansión del difícil proceso de gen descubierto las ventajas, y también recomendar a las personas que te rodean, si el programa de ciclos de PCR convencional del efecto de amplificación de genes pobre, llegué arranque en caliente plus PCR aterrizaje en el caso del alto fondo no específico, esta medida es efectiva, pero no absoluta.